Высококачественный набор для анализа аденозиндезаминазы

Аденозиндезаминаза (АДА) — природный фермент, участвующий в иммунном ответе. Функция аденозиндифосфата (АДФ) заключается в активации клеток, обеспечении проницаемости мембран и цитотоксическом эффекте. Аденозин был идентифицирован как одна из наиболее важных аминокислот, необходимых для нормальной деятельности мозга человека. Он синтезируется печенью и распределяется в плазме крови под действием иммунной системы. Аденозиндифосфат является носителем антивирусного генетического материала. На выставке Biomedical Expo набор для анализа активности ADA будет использоваться в сочетании с ранее упомянутым цитокином BioVision.

Аденозиндифосфат (АДФ) является переносчиком фактора роста Т-лимфоцитов. В цитокине BioVision аденозиндезаминаза (ADO) экстрагируется из рассеченной почки и анализируется с помощью коммерчески доступного спектрофотометрического автоматического анализа. Реагент предварительно обрабатывали антифосфо-d-глюкозой (PI), чтобы предотвратить его реакцию с аналитом.

В состав имеющегося в продаже набора AIDA Activity Assay Kit входят два основных компонента – реагент и лабораторное оборудование. Реагенты, содержащиеся в наборе для анализа активности Aida, включают смесь очищенных ферментов (Sigma-FCA). Лабораторное оборудование состоит из сканера микропланшетов (установленного за предметным стеклом микроскопа), стеклянной посуды, журнала результатов стандартных кривых и бутыли для промывки. Перед использованием образцы набора для анализа активности Aida необходимо промыть дехлорированной водой. Использование реагентов и лабораторного оборудования не ограничивается только лабораторными исследованиями.

Чтобы проверить способность набора для анализа активности Aida измерять общую активность аденозиндезаминазы, было проведено несколько экспериментальных сеансов. Первая сессия состояла из четырех дней ручного отслеживания. Сто пятьдесят микролитров Аида-GFP растворяли в водопроводной воде и смешивали с фосфатно-солевым буферным раствором. Через двадцать минут образцы тестировали на масс-балансовом экране ВЭЖХ.

Вторая сессия включала два дополнительных дня ручного отслеживания. Образцы вводили в кривую кассету в течение двух часов, как описано выше. Третий сеанс включал три дополнительных дня ручного отслеживания в той же комнате, за которыми следовали четырехчасовые подкожные инъекции аденозиндезаминазы (ADCA). Образец крови для анализа был взят через час.

Для исследования слюны пятьсот микролитров стандартных растворов дезаминазы и рН-розы смешивали в нестерильном пуансоне. Свиньям по желанию разрешалось пить целый ряд жидкостей: от простой воды до диетической газировки. Когда стандартные растворы достигали температуры кипения, в них вставляли капельницу с заранее определенным объемом слюны и измеряли активность аденозиндезаминазы.

Последнюю группу из шести образцов анализировали с использованием коммерчески доступного набора для анализа фосфоримидазоламина на основе слюны (Saproflavil; Thermo Instruments). В этой серии анализов одну каплю реагента фосфоримидазоламин/слюнная ада смешивали с объемом водопроводной воды и к образцам добавляли высушенный порошок. Через тридцать минут была взята вторая проба того же образца. В этом случае активность слюны измеряли сразу. Набор был специально разработан для измерения активности кислоты в слюне человека. Как и ожидалось, можно было обнаружить значительную активность.

Как и ожидалось, оба анализатора дали схожие результаты. Высокоспецифичный характер анализа слюнно-позитронно-эмиссионной томографии (ОФЭКТ) в сочетании с высокочувствительной методологией (высокий уровень обнаружения внутриротовой жидкости) привел к неизменно высокой точности и значимым измерениям. Все сотрудники лаборатории, использованные для проведения процедур, были экспертами в этой области. Не было никаких доказательств загрязнения или какой-либо ошибки эксперимента. Испытуемые дали информированное согласие, и процедура проводилась в соответствии с рекомендациями Американской ассоциации клинических эндокринологов. В целом результаты, полученные с помощью набора для анализа аденозиндезаминазы, показали хорошую воспроизводимость, что было подтверждено отдельными исследованиями в независимых клинических лабораториях.