NEFA Assay Kit — это инструмент для количественного определения NEFA.

Набор для анализа NEFA представляет собой инструмент для количественного определения NEFA (оксида азота). Он используется для определения концентрации НЭЖК в образцах крови или тканей. НЭЖК являются жизненно важным питательным веществом, которое отвечает за регуляцию энергетического обмена, сердечной возбудимости, нервно-мышечной проводимости, кровяного давления и свертывания крови. В основном он содержится в костях, мышцах, мягких тканях и эритроцитах.

Подготовка

NEFA представляет собой небольшой белок массой 50,2 кДа, способный связываться с ДНК. Это цитозольный комплекс синтаз жирных кислот I типа (FAS), который производит неэтерифицированную пальмитиновую кислоту. В присутствии ацил-КоА-оксидазы (ACS) комплекс FAS окисляет 3-метил-N-этил-N-(b-гидроксиэтил)-анилин до 4-аминоантипирина, который является молекулярным предшественником ацетил-КоА. Этот процесс является важнейшим ферментативным процессом для всех эукариотических организмов.

Хотя НЭЖК, возможно, не имеют такой большой массы, как жир, они являются важным источником топлива для периферических тканей. Метаболизируется в печени и транспортируется в комплексе с альбумином в периферические ткани. NEFA также высвобождается тиоэстеразным (TE) доменом комплекса FAS.

Пипетирование

Наборы ELISA используются для обнаружения небольших химических соединений, белков и пептидов. Эти наборы основаны на рекомбинантных белках, экспрессируемых в E.coli. Наборы не содержат азида, тимеросала и других природных ресурсов.

В наборе имеются такие реагенты, как БСА, апирогенный буфер для разведения и промывной раствор. Промывной раствор стабилен в течение двух недель при температуре 2–8 градусов Цельсия. Буфер для разведения содержит 0,9% физиологический раствор.

Комплект имеет внутренний стандарт NEFA. В него добавлен НЭЖК в концентрации, соответствующей ожидаемой концентрации в образце. Поглощение сине-фиолетового пигмента при длине волны 546 нм измеряется для расчета концентрации НЭЖК в образце.

Колориметрический

Использование набора WAKO NEFA дало различные результаты, в том числе бессмысленные. Тем не менее, набор NEFA является достойным соперником, когда дело доходит до определения относительного содержания жирных кислот в образцах тканей животных. Таким образом, набор NEFA является одним из наиболее популярных лабораторных тестов. В комплект входят инструкции по тестированию различных типов образцов, включая кровь, сыворотку, слюну и различные липиды.

Самая интересная часть набора заключается в том, что его можно использовать для измерения различных жирных кислот, в том числе тех, которые обычно содержатся в липидах. В комплект входит ряд ферментов, предназначенных для обнаружения различных жирных кислот, включая жирные кислоты C-8 и C-16, обнаруженные в организме человека и животных. Тем не менее, набор не рекомендуется использовать при высокоточных концентрациях СЖК в широком диапазоне.

Электрохимический

НЭЖК являются важными жирными кислотами для здоровья человека, но их редко оценивают. Кроме того, их обнаружение очень дорогое. Следовательно, мониторинг изменений их концентраций может помочь в более точной профилактике и лечении заболеваний. В этом исследовании был разработан набор для электрохимического анализа NEFA с использованием PDA-MWCNT в качестве сенсорной поверхности. Этот электрод продемонстрировал хорошую электрокалитическую активность на стадиях окисления НЭЖК и мог быть использован в реальных приложениях.

Ферментный электрод состоял из многослойной композитной пленки PDA-MWCNT и ACOD, ACS и полимера. Порядок слоев подбирался в соответствии с порядком ферментативной реакции. Было установлено, что ACS и ACOD остаются биологически активными в пленке.

Концентрация NEFA при СД2

Концентрации НЭЖК в крови изучались в контексте ожирения и гипертонии. Было показано, что эти соединения способствуют повышению АД за счет а1-адренергической стимуляции и усиления оксидантного стресса. НЭЖК также связаны с метаболическим синдромом. Эти соединения могут иметь важное значение в развитии гипертонии.

Было предложено несколько моделей для описания реакции NEFA в плазме на внутривенное введение глюкозы. Бостонская модель точно отобразила четвертую фазу увеличения концентрации NEFA. Однако модель не описывала начальную латентную фазу. Модель Фабиана использовала простую экспоненциальную зависимость для описания этой фазы. Точно так же модель Томасета не смогла описать фазу отскока.

Уровни NEFA в триглицеридах

В нескольких исследованиях изучалось влияние бариатрической хирургии на состав NEFA в плазме. Согласно метаанализу, опубликованному в 2016 году, уровни НЭЖК в сыворотке крови снизились через 6 и 12 месяцев после операции. Возможно, это произошло из-за снижения уровня инсулина. В другом исследовании НЭЖК в плазме измерялись у группы пациентов с ожирением до и после операции обходного желудочного анастомоза по Ру.

Концентрации семи НЭЖК снизились через 9 месяцев после операции. Линолеат (жирная кислота омега-6) был уменьшен на 18:2, стеарат на 18:0 и олеат на 16:0. Однако концентрация докозагексаеноата не изменилась. НЭЖК были преобразованы в метиловые эфиры жирных кислот (МЭЖК). Затем их анализировали методом газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС).